Hvad er DNA-transformation
Plasmid- eller vektortransformation er den proces, hvorved eksogent DNA overføres til værtscellen. Transformation indebærer normalt optagelse af DNA i bakterie-, gær- eller planteceller, mens transfektion er et udtryk, der normalt er forbeholdt pattedyrceller. fremgangsmåde til transformation af en DNA-konstruktion til en værtscelle er kemisk transformation, elektroporation eller partikelbombardement. Ved kemisk transformation gøres celle kompetente (i stand til at optage eksogent DNA) ved behandling med divalente kationer såsom calciumchlorid, som gør bakterien cellevæg mere gennemtrængelig for DNA. Varmechok bruges til midlertidig dannelse porer i cellemembranen, hvilket muliggør overførsel af det eksogene DNA til cellen. Ved elektroporation anvendes en kort elektrisk puls til at gøre bakteriecellen midlertidig permeabel. Partikelbombardement anvendes typisk til transformation af planteceller. Guld- eller wolframpartikler overtrækkes med DNA-konstruktionen og tvinges fysisk ind i cellen med genpistolen.
DNA-transfektionsprotokol “
Guide til fejlfinding af DNA-transfektion “