Hva er DNA-transformasjon
Plasmid- eller vektortransformasjon er prosessen der eksogent DNA overføres til vertscellen. Transformasjon innebærer vanligvis opptak av DNA til bakterie-, gjær- eller planteceller, mens transfeksjon er et begrep som vanligvis er reservert for pattedyrceller. metoden for transformasjon av en DNA-konstruksjon til en vertscelle er kjemisk transformasjon, elektroporering eller partikkelbombardement. Ved kjemisk transformasjon blir celle gjort kompetent (i stand til å ta opp eksogent DNA) ved behandling med divalente kationer som kalsiumklorid, som gjør bakterien cellevegg mer gjennomtrengelig for DNA. Varmesjokk brukes til midlertidig dannelse porene i cellemembranen, noe som tillater overføring av det eksogene DNA til cellen. Ved elektroporering brukes en kort elektrisk puls for å gjøre bakteriecellen midlertidig permeabel. Partikkelbombardement brukes vanligvis til transformasjon av planteceller. Gull- eller wolframpartikler er belagt med DNA-konstruksjonen og fysisk tvunget inn i cellen av genpistolen.
DNA-transfeksjonsprotokoll «
Feilsøkingsveiledning for DNA-transfeksjon «