Gélose au sang, hémolyse et réactions hémolytiques
La gélose au sang est un milieu de croissance solide contenant des globules rouges. Le milieu est utilisé pour détecter les bactéries qui produisent des enzymes pour briser les cellules sanguines. Ce processus est également appelé hémolyse. Le degré dhémolyse des cellules sanguines est utilisé pour distinguer les bactéries les unes des autres.
Le milieu de gélose au sang est préparé en deux étapes. Tout dabord, un certain nombre dingrédients sont ajoutés à leau, y compris linfusion cardiaque, la peptone et le chlorure de sodium. Cette solution est stérilisée. Après la stérilisation, une quantité connue de sang stérile est ajoutée. Le sang peut provenir de lapin ou de mouton. Le sang de lapin est préféré si la bactérie cible appartient au groupe connu sous le nom de streptocoque du groupe A. Le sang de mouton est préférable si la bactérie cible est Haemophilus parahaemolyticus.
La gélose au sang est une riche source de nourriture pour les bactéries. Ainsi, il peut être utilisé pour la culture primaire, cest-à-dire comme moyen dobtenir une gamme de croissance bactérienne aussi large que possible à partir dun échantillon. Cependant, il nest généralement pas utilisé à cette fin en raison du coût du support. Dautres géloses moins chères feront la même chose. La gélose au sang convient uniquement à la détermination de lhémolyse.
Lhémolyse est la dégradation de la membrane des globules rouges par une protéine bactérienne appelée hémolysine, qui provoque la libération dhémoglobine du sang rouge cellule. De nombreux types de bactéries possèdent des protéines hémolytiques. On pense que ces protéines agissent en sintégrant dans la membrane du globule rouge et en perforant un trou à travers la membrane ou en perturbant la structure de la membrane dune autre manière. Les détails moléculaires exacts de laction de lhémolysine ne sont toujours pas résolus.
Le sang utilisé dans la gélose est également traité au préalable pour éliminer une molécule appelée fibrine, qui participe à la coagulation du sang. Labsence de fibrine garantit que la coagulation du sang ne se produit pas dans la gélose, ce qui pourrait interférer avec la détection visuelle des réactions hémolytiques.
Il existe trois types dhémolyse, appelés alpha, bêta et gamma. Lhémolyse alpha est une décoloration verdâtre qui entoure une colonie bactérienne poussant sur la gélose. Ce type dhémolyse représente une décomposition partielle de lhémoglobine des globules rouges. Lhémolyse alpha est caractéristique de la pneumonie à Streptococcus et peut donc être utilisée comme une caractéristique diagnostique dans lidentification de la souche bactérienne.
Lhémolyse bêta représente une dégradation complète de lhémoglobine des globules rouges à proximité dun colonie bactérienne. Il y a une compensation de la gélose autour dune colonie. Lhémolyse bêta est caractéristique de Streptococcus pyogenes et de certaines souches de Staphylococcus aureus.
Le troisième type dhémolyse est en fait labsence dhémolyse du tout. Lhémolyse gamma est un manque dhémolyse dans la zone autour dune colonie bactérienne. Une plaque de gélose au sang présentant une hémolyse du gamma apparaît en fait brunâtre. Il sagit dune réaction normale du sang aux conditions de croissance utilisées (37 ° C en présence de dioxyde de carbone). Lhémolyse gamma est une caractéristique dEnterococcus faecalis.
Les réactions hémolytiques peuvent également montrer une certaine synergie. Autrement dit, la combinaison de réactions produit une réaction qui est plus forte que lune ou lautre réaction seule. Certaines espèces de bactéries, telles que le streptocoque du groupe B (par exemple Streptococcus agalactiae) sont faiblement bêta-hémolytiques. Cependant, si les bactéries sont à proximité immédiate dune souche de Staphylococcus, les bétahémolysines des deux organismes peuvent se combiner pour produire une réaction bêta-hémolytique intense. Ceci forme la base dun test appelé test CAMP (après les initiales de ses inventeurs).
La détermination de lhémolyse et des réactions hémolytiques est utile pour distinguer différents types de bactéries. Des tests biochimiques ultérieurs peuvent affiner encore plus lidentification. Par exemple, une réaction hémolytique bêta est indicative dun streptocoque. Le test des organismes Streptococcus avec de la bacitracine est souvent la prochaine étape. La bacitracine est un antimicrobien produit par la bactérie Bacillus subtilis. Les souches de Streptococcus pyogenes sont presque uniformément sensibles à la bacitracine. Mais dautres groupes antigéniques de Streptococcus ne sont pas sensibles à la bacitracine.
Voir aussi Techniques de laboratoire en microbiologie; Staphylocoques et infections à staphylocoques; Streptocoques et infections streptococciques