Veriagar, hemolyysi ja hemolyyttiset reaktiot

Veriagar on kiinteä kasvualusta, joka sisältää punasoluja. Väliainetta käytetään bakteerien havaitsemiseen, jotka tuottavat entsyymejä verisolujen hajottamiseksi. Tätä prosessia kutsutaan myös hemolyysiksi. Verisolujen hemolyysiastetta käytetään bakteerien erottamiseen toisistaan.

Veriagar-väliaine valmistetaan kaksivaiheisessa prosessissa. Ensin lisätään veteen useita ainesosia, mukaan lukien sydäninfuusio, peptoni ja natriumkloridi. Tämä liuos steriloidaan. Steriloinnin jälkeen lisätään tunnettu määrä steriiliä verta. Veri voi olla kaneista tai lampaista. Kaninveri on edullinen, jos kohdebakteeri on ryhmästä, joka tunnetaan nimellä ryhmä A Streptococcus. Lampaanveri on edullinen, jos kohdebakteeri on Haemophilus parahaemolyticus.

Veriagar on rikas bakteerien ravintolähde. Joten sitä voidaan käyttää ensisijaiseen viljelyyn, toisin sanoen keinona saada mahdollisimman laaja valikoima bakteerikasvua näytteestä. Sitä ei tyypillisesti käytetä tähän tarkoitukseen väliaineen kustannusten vuoksi. Muut, halvemmat agarit tekevät saman. Veriagar soveltuu ainutlaatuisesti hemolyysin määrittämiseen.

Hemolyysi on punasolujen membraanin hajoaminen bakteeriproteiinilla, joka tunnetaan nimellä hemolysiini, mikä aiheuttaa hemoglobiinin vapautumisen punasolusta. solu. Monen tyyppisillä bakteereilla on hemolyyttisiä proteiineja. Näiden proteiinien uskotaan toimivan integroitumalla punasolujen kalvoon ja joko reiittämällä reiän kalvon läpi tai rikkomalla kalvon rakenteen jollakin muulla tavalla. Hemolysiinin vaikutuksen tarkat molekyylitiedot ovat edelleen ratkaisematta.

Myös agarissa käytetty veri käsitellään etukäteen fibriiniksi kutsutun molekyylin poistamiseksi, joka osallistuu veren hyytymiseen. Fibriinin puuttuminen varmistaa, että veren hyytymistä ei esiinny agarissa, mikä voi häiritä hemolyyttisten reaktioiden visuaalista havaitsemista.

Hemolyysiä on kolme tyyppiä, alfa, beeta ja gamma. Alfa-hemolyysi on vihertävä värimuutos, joka ympäröi agarilla kasvavaa bakteeripesäkettä. Tämän tyyppinen hemolyysi edustaa punasolujen hemoglobiinin osittaista hajoamista. Alfa-hemolyysi on tyypillistä Streptococcus-keuhkokuumeelle, joten sitä voidaan käyttää diagnostisena ominaisuutena bakteerikannan tunnistamisessa.

Beeta-hemolyysi edustaa punasolujen hemoglobiinin täydellistä hajoamista bakteeripesäkkeeseen. Siirtomaa ympäröi agari. Beeta-hemolyysi on ominaista Streptococcus pyogenesille ja joillekin Staphylococcus aureus -kannoille.

Kolmas hemolyysityyppi ei todellakaan ole lainkaan hemolyysi. Gamma-hemolyysi on hemolyysin puute bakteeripesäkkeen ympärillä. Verihiutaleet, jotka näyttävät gamma-hemolyysiä, näyttävät todella ruskehtavilta. Tämä on veren normaali reaktio käytettyihin kasvuolosuhteisiin (37 ° C hiilidioksidin läsnä ollessa). Gammahemolyysi on tyypillinen Enterococcus faecalisille.

Hemolyyttiset reaktiot voivat myös osoittaa synergiaa. Toisin sanoen reaktioiden yhdistelmä tuottaa reaktion, joka on vahvempi kuin kumpikin reaktio yksinään. Tietyt bakteerilajit, kuten B-ryhmän Strep (n esimerkki on Streptococcus agalactiae), ovat heikosti beeta-hemolyyttisiä. Kuitenkin, jos bakteerit ovat lähellä Staphylococcus-kantaa, näiden kahden organismin beeta-hemolysiinit voivat yhdistyä tuottamaan voimakkaan beeta-hemolyyttisen reaktion. Tämä muodostaa perustan testille, jota kutsutaan CAMP-testiksi (keksijöiden nimikirjainten jälkeen).

Hemolyysin ja hemolyyttisten reaktioiden määrittäminen on hyödyllistä erilaisten bakteerityyppien erottamisessa. Myöhemmät biokemialliset testit voivat kaventaa tunnistamista entisestään. Esimerkiksi beeta-hemolyyttinen reaktio on osoitus Streptococcuksesta. Streptococcus-organismien testaaminen basitrasiinilla on usein seuraava vaihe. Basitrasiini on mikrobilääke, jonka tuottaa bakteeri Bacillus subtilis. Streptococcus pyogenes -kannat ovat lähes yhtä herkkiä basitrasiinille. Mutta muut Streptococcuksen antigeeniryhmät eivät ole herkkiä basitrasiinille.

Katso myös mikrobiologian laboratoriotekniikat; Stafylokokit ja stafylokokki-infektiot; Streptokokit ja streptokokki-infektiot