T-follikulaaristen auttajasolujen kehityksen ja toiminnan ymmärtäminen

Luontainen immuunijärjestelmä laukaisee naiivisen T-solujen aktivaation ja toiminnallisen erilaistumisen. Vastauksena patogeeneihin dendriittisolut (DC) säätelevät kostimulatorisia molekyylejä auttaakseen antigeenispesifisiä T-soluja. Lisäksi APC: t erittävät myös useita sytokiineja, jotka säätelevät T-solujen terminaalista erilaistumista efektorisiksi T-soluiksi. Viimeaikaiset tutkimukset ovat vakiinnuttaneet kriittiset roolit kostimulatorisille molekyyleille ja tietyille sytokiineille Tfh-solujen erilaistumisessa (kuva 2).

Kostimulaatio

T-solujen aktivaatiota säätelevät kostimulaatiomolekyylit. CD28, joka ilmentyy naiiveilla T-soluilla, on tärkein T-solujen aktivaatioon osallistuva kostimulatorinen reseptori.28 CD28: n tai sen ligandien CD80 ja CD86 puuttuessa Th-solujen erilaistumisen havaittiin merkittävästi vähentyneen. CD28-kostimulaatio on myös välttämätöntä Tfh-solujen kehitykselle, joten CD28-puutteelliset hiiret liittyvät CXCR5: n ja OX40: n epäregulaatioon T-soluissa ja häiriintyneisiin itusolujen keskuksen muodostumiin.17 CD28-välitteiset vastaukset, Tfh-solujen ja itusolu- keskuksen muodostumisesta tulee riippumaton CD28: sta ja riippuvainen ICOS: sta, kun E3-ubikvitiiniligaasi Roquin on mutatoitunut. 29

ICOS kuuluu CD28-perheeseen ja ilmentyy aktivoiduissa T-soluissa. 30, 31, kun taas sen ligandi B7h, ilmentyy laajasti APC-soluissa ei-lymfoidisissa kudoksissa. 32, 33 ICOS-B7h-vuorovaikutus on välttämätön optimaaliselle T-solujen aktivaatiolle sekä tietyille efektoritoiminnoille, kuten IL-4: n ja IL-17: n ilmentämiselle. 36, 37, 38 Lisäksi ICOS: lla on tärkeä rooli T-soluista riippuvien vasta-ainevasteiden ja itusolujen keskusten reaktioiden säätelyssä. Hiirillä, joilta puuttuu ICOS tai B7h, esiintyy heikentynyttä alkukeskuksen muodostumista ja isotyyppien vaihtamista. 34, 35, 36, 37, 39 Äskettäin tämän kostimulaatioreitin havaittiin olevan tärkeä myös CXCR5 + Tfh -solujen muodostumiselle ja ylläpidolle. Tarkemmin sanottuna ICOS-puutteellisissa hiirissä CXCR5 + Tfh -solujen kehitys oli heikentynyt vastauksena lampaiden punasoluilla tapahtuvaan primaariseen tai sekundääriseen immunisointiin.6 Samaan aikaan B7h: n ablaatio APC: llä johti T-solujen IL-21: n ilmentymisen vähenemiseen. on myös osoitettu, että ihmisen tonsilliitti CXCR5 + T-solut ilmentävät ICOS: ää voimakkaasti itukeskusten valovyöhykkeellä ja tukevat tehokkaasti immunoglobuliinituotantoa.40, 41 Lisäksi ICOS-puutos ihmisillä ja hiirillä johti huomattavasti pienempään Tfh-solujen määrään ja syviin virheisiin B-solujen kypsyminen ja immunoglobuliini-isotyyppien vaihtaminen, mikä osoittaa ICOS: n olennaisen roolin Tfh-solujen erilaistumisessa. , joka liittyy huomattavasti lisääntyneeseen Tfh-solujen määrään ja lisääntyneeseen IL-21- ja ICOS-ilmentymiseen. 13

Koska B7h on B-soluilla ilmentyneenä, tutkittiin, vaatiiko Tfh-solujen muodostuminen sukulaisten B-T-solujen vuorovaikutusta. 24 Ehdollisen poistohiiren analyysi, josta puuttui B7h: n B-solujen ilmentyminen, paljasti, että ICOS-ligandin puuttuminen B-soluista johtaa suuresti pienentynyt Tfh-solutaajuus. Alemman CXCR5-ilmentymisen lisäksi havaitsimme, että T-solujen IL-21-ilmentyminen väheni huomattavasti näissä hiirissä. ICOS-B7h-vuorovaikutus voi siten säätää Tfh-soluja tuottamalla IL-21: tä. Havaitsimme myös, että antigeenispesifinen IgG-tuotanto ja maapähkinäagglutiniini (PNA) + sukukeski-B-solut vähenivät huomattavasti ilman B7h-ilmentymistä B-soluissa. Tietomme osoittavat siten, että B7h-ilmentyminen B-soluissa on välttämätöntä CXCR5 + Tfh -solujen muodostamiseksi, samoin kuin IL-21-tuotannolle ja sopiville vasta-ainevasteille, mikä viittaa B-solujen tärkeään in vivo -toimintaan Tfh-solujen muodostuksessa tai ylläpidossa. .

Kaikki yllä olevat havainnot viittaavat siihen, että Tfh-solujen kehityksen ja itukeskuksen muodostumisen puutteet ICOS-puutteellisissa hiirissä ja potilailla voivat johtua osittain puutteellisesta IL-21-tuotannosta, joka yleensä toimii autokriinisenä. tekijä, joka laajentaa Tfh-solupopulaatiota. Itse asiassa Tfh-solujen lukumäärä väheni IL-21-puutteellisissa hiirissä. Äskettäin tehty tutkimus osoitti, että ICOS edistää Tfh-solujen muodostumista säätämällä c-Maf-ilmentymistä, mikä lisäsi IL-21: n ilmentymistä annoksesta riippuvalla tavalla.42 ICOS: n indusoima c-Maf -ekspressio voi siis tukea Tfh-solujen muodostumista ja ylläpitoa autokriinisen kasvutekijän IL-21 tuotanto.

SAP ilmentyy T-soluissa ja välittää vastauksia SLAM-perheen jäsenille sitoutumalla näiden reseptorien konservoituneeseen domeeniin. SLAM-reseptoriperhe koostuu seitsemästä jäsenestä: CD150 / SLAM, CD48 / SLAMF2, CD229 / Ly9 / SLAMF3, CD224 / 2B4 / SLAMF4, CD84 / SLAMF5, NTB-A / Ly108 / SLAMF6 ja CD319 / CRACC / SLAMF7.SAP: n mutaatio ihmisillä, samoin kuin tutkimukset, joihin osallistui SAP: n puutteellisia hiiriä, viittasivat SAP: n kriittiseen rooliin B-solujen avustamisessa ja luokan vaihtamisessa Th-soluissa. kohonnut ja pitkittynyt CD40L-ilmentyminen. 44 SAP-puutteelliset CD4 + T-solut eivät myöskään pysty stabiilisti vuorovaikutukseen sukulaisten B-solujen kanssa, joten ne eivät indusoi B-solujen klonaalista laajenemista.45 Nämä puutteelliset T-solut ilmentävät kuitenkin edelleen normaalia CXCR5-tasoa. SAP: lla on siten keskeinen rooli Tfh-soluvälitteisessä sukusolujen muodostumisessa sen jälkeen, kun hän on kohdannut sukulaisen B-solun, sen sijaan, että säätelisi Tfh-solujen migraatiota. ja hiiren Tfh-solut. 46, 47 CD84-puutteellisia hiiriä käyttäen Cannons et ai. osoittivat, että CD84 tarvitaan itukeskipisteiden muodostumiseen ja Tfh-solujen erilaistumiseen in vivo T-solujen sisäisellä tavalla.47 Siksi CD84-SAP-akseli on todennäköisesti kanoninen reitti CD4 + T-soluissa, joka välittää Tfh-solujen kehitystä ja toimintaa.

Sytokiinit

Sytokiinit ovat tärkeimpiä Th-solujen erilaistumisen säätelijöitä. IL: n avulla edistetään 3, 3 Th1-erilaistumista. -12 aktivoimalla STAT4: n. IFN-y-STAT1-reitti puolestaan ylläpitää Th1-solujen kehitystä, mikä johtaa transkriptiotekijän T-bet induktioon.Samaan aikaan IL-4: ää erittävät aktivoidut T-solut ja ajaa Th2-polarisaatiota STAT6-riippuvainen tapa, joka johtaa transkriptiotekijän GATA3 aktivoitumiseen Lisäksi IL-6 / IL-21, yhdessä TGF-p: n kanssa, indusoi Th17-solujen erilaistumisen STAT3: sta riippuvan RORy: n uudelleenregulaation kautta. Tämä sytokiinivälitteinen Tfh-solujen erilaistuminen vaihtelee kuitenkin hiirten ja ihmisten välillä.

IL-21

IL-21: llä on kriittinen rooli immunoglobuliinin tuotannon ja alkukeskuksen muodostumisen säätelyssä. 12, 48 Tämä sytokiinin ”reseptori kuuluu yhteiseen y-ketjujen perheeseen, joka sisältää myös IL-2-, IL-4-, IL-7-, IL-9- ja IL-15-reseptorit. IL-21-signaalit STAT3: n tai STAT5a säätelemään erilaisten solutyyppien, kuten T-solujen, B-solujen, luonnollisten tappajasolujen ja DC: n, toimintoja, ja sitä ilmentävät pääasiassa CD4 + T-solut ja luonnolliset tappaja-T-solut. 49 Aikaisemmin raportoitiin myös, että IL- 21: tä ilmentää Th2 korkeammilla tasoilla kuin Th1-soluilla.50 Jälkimmäisessä tapauksessa IL-21: n lisääminen erilaistumisen aikana vähentää IFN-y: n tuotantoa tukahduttamalla Eomes-ilmentymistä.51 On myös havaittu, että IL-21: tä indusoi IL-6 STAT3: n avulla ja yhdessä TGF-β: n kanssa on välttämätön ja riittävä Th17-solujen muodostamiseksi RO: n STAT3-riippuvaisen uudelleenregulaation avulla. Rγ.52, 53, 54 Sekä IL-21- että IL-21R-puutteellisissa hiirissä on puutteita Th17-solujen kehityksessä, mikä viittaa siihen, että IL-21 toimii autokriinisesti, aivan kuten IFN-y tekee Th1-soluille ja IL-4: lle samoin kuin Th2-soluilla.

Lisäksi itukeskuksen kehitys on heikentynyt IL-21- ja IL-21R-puutteellisissa hiirissä.12 Tässä yhteydessä IL-21: n korkeammina tuottajina kuin Th1, Th2 ja Th17-osajoukoilla, Tfh-soluilla on edullinen vaikutus vasta-aineluokan vaihtoon ja itusolujen keskuksen muodostumiseen. Kaksi ryhmää on äskettäin korostanut IL-21: n roolia Tfh-solujen ja sukusolujen keskellä olevien B-solujen tuottamisessa. 24, 55 IL-21-puutteellisten hiirten immunisointi T-soluista riippuvaisella antigeenillä johti CD4: n dramaattiseen vähenemiseen + CXCR5 + T-solut, mikä viittaa siihen, että IL-21 toimii autokriinisenä muotona Tfh-solujen kehityksen aikana.24 Tfh-solujen lisäksi havaittiin merkittävästi pienentynyttä alkukeskipisteen B-solujen määrää ja vähentynyttä IgG1-tuotantoa immunisoiduissa IL-21-puutteellisissa hiirissä . Vogelzang et ai. osoitti, että nämä viat olivat T-soluja, ei luontaisia B-soluja. 55

On osoitettu, että IL-6 indusoi IL-21: n STAT3: sta riippuvalla tavalla.24 Toisin kuin Th17 soluissa, Tfh-solujen muodostuminen oli riippumatonta TGF-β: sta tai Th17-spesifisistä orpojen ydinreseptoreista RORa ja RORγ. 24 Lisäksi olemme osoittaneet, että IL-21: tä tuottavia Th-soluja voidaan tuottaa in vitro IL-21: n läsnä ollessa, mutta ei TGF-β ja että nämä solut saavat Tfh-geeniekspressioprofiilin. 24 Näiden in vitro tuotettujen, IL-21: tä tuottavien Tfh: n kaltaisten solujen siirtäminen naiiveihin hiiriin helpotti B-solujen toimintaa, samanlainen kuin Tfh-solut. Kaiken kaikkiaan nämä havainnot vahvistavat Tfh-solujen identiteetin erillisenä Th-sukulinjana ja viittaavat siihen, että IL-21 on tärkeä Tfh-solujen muodostumiselle ja sukusolujen reaktioille hiirissä.

IL-12

Huolimatta hiiren Tfh-solujen kehityksen taustalla olevien mekanismien kuvaamisessa tapahtuneesta edistyksestä ihmisen Tfh-solujen kehityssäätö pysyi epäselvänä viime aikoihin asti. Kaksi riippumatonta tutkimusta on osoittanut, että IL-12 indusoi ihmisen Tfh: n kaltaisten solujen in vitro -generaation naiiveista CD4 + T-soluista.46, 56 Tfh-solut, jotka erilaistuvat IL-12: n vaikutuksesta, jakavat keskeiset piirteet perifeerisistä imukudoksista löydettyjen Tfh-solujen kanssa, mukaan lukien IL-21-tuotanto, jatkuva ICOS- ja CXCR5-ilmentyminen ja kyky auttaa B-solujen erilaistumista immunoglobuliini- erittävät soluja. Mielenkiintoista on, että nielurisaveren tai nisäkäsveren tai aikuisten perifeerisen veren naiivien T-solujen altistuminen IL-12: lle (Th1-olosuhteet) aiheutti IL-21: n ilmentymisen merkittävän lisääntymisen, kun taas IL-21, IL-6 ja IL-23 indusoivat IL-21: n eritystä vähemmässä määrin.46 Schmitt et ai. osoitti, että IL-12 laukaisee korkeat IL-21-tuotannon tasot STAT4-aktivaation kautta, kun taas IL-21 ja IL-23 indusoivat vähemmän IL-21-tuotantoa ihmisen CD4 + T-soluissa.56 Havaittiin myös, että IL-12: n indusoima IL-21 21: tä tuottavat solut sisälsivät IFN-y + ja IFN-y-alajoukkoja.

On epäselvää, onko autokriinisen IL-21: n ja STAT3: n aktivaatiolla mitään merkitystä IL-12: n indusoiman, IL-21: n erilaistumisessa. tuottavat ihmisillä Th-soluja. Mielenkiintoista on, että Ma et ai. osoitti, että IFN-γ + IL-21- ja IFN-γ + IL-21 + -solut ilmentävät korkeita T-bet-tasoja, kun taas IFN-γ-IL-21 + -solujen syntyminen riippuu suuresti Bcl6-ilmentymästä.46 Lisäksi IL-12: n läsnä ollessa viljellyt ihmisen naiivit CD4 + -T-solut ilmentävät korkeita CXCR5-tasoja, mikä voi olla tärkeää näiden solujen lokalisoimiseksi B-solutarpoihin. CXCR5-ilmentämisen lisäksi IL-12-hoito kohotti myös ICOS-ilmentymistä. Vielä tärkeämpää on, että in vitro IL-12-alustetut, IL-21: tä erittävät solut indusoivat merkittävästi enemmän immunoglobuliinin eritystä naiiveilla B-soluilla. Tämä vaikutus riippui IL-21- ja ICOS-signaloinnista, mutta ei IFN-y: stä. Siten ihmisen ICOS + CXCR5 + CD4 + T-solut, jotka on luotu in vitro IL-12: n läsnä ollessa, jakavat fenotyyppiset ja toiminnalliset ominaisuudet Tfh-solujen kanssa. IL-21: tä ja IL-12: ta tarvitaan siis vastaavasti hiiren ja ihmisen Tfh-solujen kehitykseen.

Tyypin I IFN: t

Tyypin I IFN: t edustavat sytokiinien perhettä, jossa on viruslääkkeitä ja immunomoduloivat toiminnot.57 Useita IFN-α-alatyyppejä ja yksi IFN-β-alatyyppi indusoituu nopeasti vastauksena infektioon ja signaaliin yhteisen IFN-α-reseptorin kautta.57 Näiden IFN: ien on osoitettu tehostavan voimakkaasti primääristä vasta-ainevastetta liukoiselle proteiiniantigeeni, lisäämällä IgG: n kaikkien alaluokkien tuotantoa.58, 59 Lisäksi tyypin I IFN: t edistivät vasta-ainevasteita, kun villityypin DC: t siirrettiin IFN-a-reseptoripuutteisiin hiiriin, mikä antoi suoraa näyttöä siitä, että tyypin I-IFN stimulointi DC: tä tehostaa in vivo immuunivastetta. 58, 59

Äskettäin tehty tutkimus paljasti, että tyypin I-IFN-signalointi DC: ssä stimuloi selektiivisesti Tfh-solujen kehitystä vasteena antigeenille, joka on sitoutunut Tollin kaltaisiin reseptori 3: n tai 4: n agonisteihin.60 Lisäksi IL-6: n DC-tuotantoa tarvitaan in vivo Tfh: lle solujen muodostuminen ja vasta-aineiden affiniteettikypsytys. Siten tyypin I IFN: t parantavat T-soluista riippuvia vasta-ainevasteita toimimalla luonnollisena adjuvanttina imusolmukkeessa asuvien CXCR5 + Tfh-solujen muodostamiseksi. Vielä on määritettävä, mikä DC-alajoukko säätelee Tfh-solujen muodostumista.

Systeemistä lupus erythematosusta (SLE) sairastavilla potilailla on lisääntynyt IFN-α-taso, joka korreloi taudin vakavuuden kanssa.61 Lisäksi tutkimukset eri lupus-altis hiirikanta on paljastanut tyypin I IFN: ien kriittisen roolin lupuksen kaltaisessa patologiassa. 62, 63, 64 Tfh-solujen lisääntynyttä määrää on havaittu myös SLE, 6, 65 -hiirimalleissa, joissa niitä tarvitaan lupuksen suhteen -tyyppistä patologiaa.66 Tyypin I IFN-riippuvaista Tfh-solujen muodostumista autoimmuunivasteen aikana ei kuitenkaan ole vielä käsitelty ja se vaatii lisätutkimuksia.

Transkriptiotekijät

Naiivien erilaistuminen CD4 + T-solut eri linjoihin määritetään sytokiinisignaloinnilla ja spesifisten transkriptiotekijöiden myöhemmällä aktivaatiolla (kuvio 1). Esimerkiksi IFN-y / IL-12-signalointi STAT1 / STAT4: n kautta säätelee T-bet-transkriptiota Th1-soluissa, 67 kun taas IL-4-signalointi STAT6: n kautta aktivoi GATA3-ilmentymisen Th2-soluissa. 68 IL-6 ja IL-21 toimivat molemmat STAT3, mikä johtaa kahden Th17-spesifisen orpojen ydinreseptorin RORγ ja RORα ilmentämisen säätelyyn, jotka lopulta määrittävät Th17-solujen terminaalisen erilaistumisen. 3 Tfh-solujen erilaistumisen osalta on osoitettu, että kumpikaan ) eikä Th2-selektiivisiä (STAT6, GATA3) transkriptiotekijöitä vaaditaan.24 Huolimatta siitä, että sekä Th17- että Tfh-sukulinjat vaativat IL-6 / IL-21 ja STAT3, Tfh-solujen kehitys ei vaadi Th17: een liittyviä transkriptiotekijöitä (RORα ja RORy). Pikemminkin Bcl6 on Tfh-solujen erilaistumisen master-transkriptiosäädin.

STAT3

IL-21: n on raportoitu olevan välttämätön Tfh-solujen erilaistumiselle24, ja IL-21: n indusoima T-soluissa. 6 määrittämään, tarvitaanko STAT3-signalointia Tfh-solujen kehitykseen, Nurieva et ai. analysoitu Tfh-solujen muodostuminen Stat3f / f-hiirissä ristissä CD4-cre-hiirien kanssa.24 Näiden hiirten immunisointi avaimenreiän limetsemosyaniinilla täydellisessä Freundin adjuvantissa paljasti CXCR5 + Tfh-solujen suuren vähenemisen STAT3: n puuttuessa. Lisäksi TAT-solujen STAT3-puutos johti puutteelliseen itiökeskuksen B-solujen tuottamiseen ja vähentyneeseen avaimenreikä limpet hemosyaniinispesifiset IgG ja IgM. Siten STAT3: lla on tärkeä rooli Tfh-solujen erilaistumisessa.

Bcl6

Transkriptiotekijä Bcl6 ilmentyy selektiivisesti hiiren ja ihmisen Tfh-soluissa. 69, 70 Aikaisemmin sen osoitettiin estävän Th2-vasteita estämällä STAT6: n sitoutuminen DNA: han, 71, 72, kun taas Bcl6-puutteellisilla hiirillä on monielinten tulehdussairauksia, lisääntynyt IgE-tuotanto ja puutteelliset itusolukeskuksen reaktiot. 71, 73 oli epäselvää, johtuuko näiden hiirten sukukeskipistevika oikean T- ja / tai B-solutoiminnan puuttumisesta, koska sukukeskipisteen B-solut ilmentävät myös Bcl6,74: ää. Ryhmämme ja muut osoittivat äskettäin, että transkriptiotekijä Bcl6 on mestari r Tfh-solujen erilaistumisen egulaattori. 25, 26, 27

Bcl6-ilmentymisen indusoivat IL-6 ja IL-21, ja Bcl6: n yli-ilmentyminen edistää Tfh-solujen kehitystä eksogeenisten sytokiinien puuttuessa. 25 Bcl6-yliekspressio johtaa myös endogeenisen Bcl6-mRNA: n sekä IL-21R-, IL-6R- ja CXCR5-mRNA: n lisääntyneeseen ilmentymiseen, kuten tapahtuu soluissa, joita on käsitelty IL-6: lla tai IL-21: llä. Mielenkiintoista on, että IL-21: n ilmentymistä ei säännelty Bcl6: n yliekspressoinnilla. Bcl6-ilmentymistä ei myöskään vaadittu Th1-, Th2- tai Th17-solujen kehittymiseen, ja itse asiassa Bcl6: n yli-ilmentyminen tukahdutti Th1-, Th2- ja Th17-sytokiinien tuotannon. sitoutuminen 25, 26 Se sitoutuu transkriptiosäätimien T-bet ja RORy promoottoreihin, jotka määrittävät vastaavasti Th1- ja Th17-solujen kohtalon, mikä johtaa IFN-y: n ja IL-17: n tuotannon tukahduttamiseen.26 Lisäksi Bcl6 tukahduttaa sellaisten mikroRNA: iden ilmentyminen, joiden uskotaan estävän Tfh-solujen allekirjoitusta, mukaan lukien miR-17-92, joka tukahduttaa CXCR5-ilmentymisen. Siten Bcl6 säätelee Tfh-solujen kehitystä repressoimalla Th1-, Th2- ja Th17-spesifisiä transkriptiotekijöitä. Bcl6-puutos T-soluissa johti heikentyneeseen Tfh-solujen kehitykseen sekä in vitro että in vivo, ja sekä B- että T-solujen puute vaaditaan sukusolu-reaktioissa. 25, 26, 28

Nämä yhdessä tulokset osoittavat, että Bcl6 on sekä välttämätön että riittävä Tfh-solujen kehitykseen, ja tarjoavat lisää todisteita siitä, että Tfh-solut ovat erillinen Th-solujen sukulinja.

c-Maf

c- Maf oli ensimmäinen transkriptiotekijä, jonka havaittiin ilmentyvän ensisijaisesti Th2-soluissa.75 Se sitoutuu proksimaaliseen IL-4-promoottoriin75 ja toimii Th2-spesifisenä tekijänä. T-solut, joista puuttuu c-Maf, olivat heikentyneet IL-4-ilmentämisessä efektorivaiheen aikana, kun taas muiden Th2-sytokiinien ilmentyminen oli joko kohtuullisesti vähentynyt tai ei vaikuttanut siihen. 76 Aikaisemmin, käyttämällä ICOS- ja B7h-puutteellisia hiiriä, Dong et ai. kuvatut mekanismit, joilla ICOS välittää IL-4-tuotantoa säätelemällä c-Maf-ilmentymistä efektor-Th-soluissa. Lisäksi c-Mafin yliekspressio palauttaa IL-4: n vapautumisen T-soluista, jotka aktivoituvat ilman ICOS-B7h-vuorovaikutusta. Viallisen IL-4-tuotannon lisäksi ICOS- ja B7h-puutteelliset hiiret ovat heikentyneet Tfh-solujen tuottamisessa ja IL-21-tuotannossa. 24 Kuchroo et ai. äskettäin osoittanut, että Tfh-soluille on tunnusomaista korkea c-Maf-ilmentyminen ja että c-Maf lisäsi IL-21-tasoja annoksesta riippuvaisella tavalla. 42 Samaan aikaan c-Maf-deleetio johti vähentyneeseen määrään IL-21-ilmentäviä Tfh solut.42 ICOS säätelee täten IL-21: tä tuottavien Tfh-solujen erilaistumista säätämällä c-Maf-ilmentymistä.

IFN: n säätelykerroin 4 (IRF4)

IRF4 kuvattiin alun perin Th2-spesifinen transkriptiotekijä, 78, 79 osittain, koska IRF4-puutteellisilla hiirillä on merkittävästi alentunut seerumin immunoglobuliinitaso.80 Viimeaikaiset tutkimukset kuitenkin paljastivat, että tämä transkriptiotekijä indusoituu IL-1-signaloinnilla ja on välttämätön Th17-solujen erilaistumiselle. .81, 82 IRF4-puutteellista T-solua puolestaan ei indusoi Th17-sukua IL-21- ja TGF-β-stimulaatiossa.83 Lisäksi T-soluilla, joista puuttuu IRF4: ää sitova proteiini, IRF4: n luonnollinen antagonisti, on kohonnut IL-21: n tuotanto.84 IRF4 on siten kriittinen IL-21: n ja IL-2: n tuotannolle 1-välitteinen Th-solujen erilaistuminen.

Näiden havaintojen perusteella näyttää siltä, että IRF4: llä voi olla myös rooli Tfh-solujen erilaistumisessa. Itse asiassa IRF4-puutteelliset hiiret tuottavat vähemmän CXCR5 + ICOS + Tfh -soluja immunisoinnin yhteydessä, 85 mikä osoittaa IRF4: n merkityksen in vivo Tfh-solujen erilaistumisen aikana. Vielä on määritettävä, onko IRF4-riippuvainen Tfh-solujen muodostuminen T-solujen luonnostaan ja sääteleekö IRF4 Bcl6- ja B-lymfosyyttien indusoimaa kypsymisproteiini-1: tä (Blimp-1) Tfh-sukututkimuksen aikana.

Negatiivinen säätely

Tfh-solujen erilaistumista säätelee ohjelma, joka vastustaa muiden Th-sukujen kehitystä tukahduttamalla sukuspesifisiä transkriptiotekijöitä (T-bet, GATA3 ja RORγ). Ei ole kuitenkaan raportoitu, säätelevätkö nämä tekijät negatiivisesti myös Tfh-solujen erilaistumista. Blimp-1, jonka aiemmin kuvattiin antagonisoivan Bcl6: ta B-soluissa, 86 vähenee merkittävästi Tfh-soluissa verrattuna muihin kuin Tfh CD4 + T -soluihin. Tfh-solujen erilaistuminen vaikuttamatta Th2-, Th17- ja Treg-solujen kehitykseen. Lisäksi Blimp-1-puutteelliset CD4 + T-solut osoittivat lisääntynyttä erilaistumista Tfh-sukuun.27