Agar sangre, hemólisis y reacciones hemolíticas
El agar sangre es un medio de crecimiento sólido que contiene glóbulos rojos. El medio se usa para detectar bacterias que producen enzimas para descomponer las células sanguíneas. Este proceso también se denomina hemólisis. El grado en que se hemolizan las células sanguíneas se utiliza para distinguir las bacterias entre sí.
El medio de agar sangre se prepara en un proceso de dos pasos. Primero, se agregan varios ingredientes al agua, incluida la infusión para el corazón, la peptona y el cloruro de sodio. Esta solución está esterilizada. Después de la esterilización, se agrega una cantidad conocida de sangre esterilizada. La sangre puede ser de conejo o de oveja. Se prefiere la sangre de conejo si la bacteria diana es del grupo conocido como estreptococo del grupo A. Se prefiere la sangre de oveja si la bacteria diana es Haemophilus parahaemolyticus.
El agar sangre es una rica fuente de alimento para las bacterias. Por lo tanto, se puede utilizar para cultivo primario, es decir, como un medio para obtener un rango de crecimiento bacteriano lo más amplio posible a partir de una muestra. Sin embargo, normalmente no se utiliza para este propósito debido al costo del medio. Otros agares menos costosos harán lo mismo. El agar sangre es especialmente adecuado para la determinación de la hemólisis.
La hemólisis es la ruptura de la membrana de los glóbulos rojos por una proteína bacteriana conocida como hemolisina, que provoca la liberación de hemoglobina de los glóbulos rojos celda. Muchos tipos de bacterias poseen proteínas hemolíticas. Se cree que estas proteínas actúan integrándose en la membrana del glóbulo rojo y perforando un agujero a través de la membrana o interrumpiendo la estructura de la membrana de alguna otra manera. Los detalles moleculares exactos de la acción de la hemolisina aún no se han resuelto.
La sangre utilizada en el agar también se trata de antemano para eliminar una molécula llamada fibrina, que participa en la coagulación de la sangre. La ausencia de fibrina asegura que la coagulación de la sangre no ocurra en el agar, lo que podría interferir con la detección visual de las reacciones hemolíticas.
Hay tres tipos de hemólisis, denominados alfa, beta y gamma. La alfa hemólisis es una decoloración verdosa que rodea a una colonia bacteriana que crece en el agar. Este tipo de hemólisis representa una descomposición parcial de la hemoglobina de los glóbulos rojos. La alfa hemólisis es característica de la neumonía por Streptococcus y, por lo tanto, se puede utilizar como característica de diagnóstico en la identificación de la cepa bacteriana.
La beta hemólisis representa una degradación completa de la hemoglobina de los glóbulos rojos en las proximidades de una colonia bacteriana. Hay un claro del agar alrededor de una colonia. La beta hemólisis es característica de Streptococcus pyogenes y algunas cepas de Staphylococcus aureus.
El tercer tipo de hemólisis es en realidad la ausencia de hemólisis. La hemólisis gamma es la falta de hemólisis en el área alrededor de una colonia bacteriana. Una placa de agar sangre que muestra hemólisis gamma en realidad parece marrón. Ésta es una reacción normal de la sangre a las condiciones de crecimiento utilizadas (37 ° C en presencia de dióxido de carbono). La hemólisis gamma es una característica de Enterococcus faecalis.
Las reacciones hemolíticas también pueden mostrar cierta sinergia. Es decir, la combinación de reacciones produce una reacción que es más fuerte que cualquier reacción sola. Ciertas especies de bacterias, como el estreptococo del grupo B (un ejemplo es Streptococcus agalactiae) son débilmente beta-hemolíticas. Sin embargo, si las bacterias están muy cerca de una cepa de Staphylococcus, las betahemolisinas de los dos organismos pueden combinarse para producir una intensa reacción beta hemolítica. Esto forma la base de una prueba llamada prueba CAMP (después de las iniciales de sus inventores).
La determinación de la hemólisis y de las reacciones hemolíticas es útil para distinguir diferentes tipos de bacterias. Las pruebas bioquímicas posteriores pueden reducir aún más la identificación. Por ejemplo, una reacción beta hemolítica es indicativa de Streptococcus. La prueba de los microorganismos Streptococcus con bacitracina suele ser el siguiente paso. La bacitracina es un antimicrobiano producido por la bacteria Bacillus subtilis. Las cepas de Streptococcus pyogenes son casi uniformemente sensibles a la bacitracina. Pero otros grupos antigénicos de Streptococcus no son sensibles a la bacitracina.
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