Was ist DNA-Transformation
Plasmid- oder Vektortransformation ist der Prozess, durch den exogene DNA in die Wirtszelle übertragen wird. Die Transformation impliziert normalerweise die Aufnahme von DNA in Bakterien-, Hefe- oder Pflanzenzellen, während die Transfektion ein Begriff ist, der normalerweise Säugetierzellen vorbehalten ist Verfahren zur Transformation eines DNA-Konstrukts in eine Wirtszelle ist chemische Transformation, Elektroporation oder Partikelbeschuss. Bei der chemischen Transformation werden Zellen durch Behandlung mit zweiwertigen Kationen wie Calciumchlorid, die das Bakterium bilden, kompetent gemacht (in der Lage, exogene DNA aufzunehmen) Zellwand für DNA durchlässiger. Hitzeschock wird verwendet, um sich vorübergehend zu bilden Poren in der Zellmembran, die den Transfer der exogenen DNA in die Zelle ermöglichen. Bei der Elektroporation wird ein kurzer elektrischer Impuls verwendet, um die Bakterienzelle vorübergehend durchlässig zu machen. Das Bombardement von Partikeln wird typischerweise zur Transformation von Pflanzenzellen verwendet. Gold- oder Wolframpartikel werden mit dem DNA-Konstrukt beschichtet und durch eine Genkanone physikalisch in die Zelle gedrückt.
DNA-Transfektionsprotokoll „
Anleitung zur Fehlerbehebung bei DNA-Transfektionen „