Vad är DNA-transformation
Plasmid- eller vektortransformation är den process genom vilken exogent DNA överförs till värdcellen. Transformation innebär vanligtvis upptagande av DNA till bakterie-, jäst- eller växtceller, medan transfektion är en term som vanligtvis är reserverad för däggdjursceller. Metoden för transformation av en DNA-konstruktion till en värdcell är kemisk transformation, elektroporation eller partikelbombardemang. Vid kemisk transformation görs celler kompetenta (förmåga att ta upp exogent DNA) genom behandling med tvåvärda katjoner, såsom kalciumklorid, vilket gör bakterien cellväggen mer genomtränglig för DNA. Värmechock används för att tillfälligt bildas porer i cellmembranet, vilket möjliggör överföring av exogent DNA till cellen. Vid elektroporation används en kort elektrisk puls för att göra bakteriecellen tillfälligt permeabel. Partikelbombardemang används vanligtvis för transformation av växtceller. Guld- eller volframpartiklar beläggs med DNA-konstruktionen och tvingas fysiskt in i cellen med genpistolen.
DNA-transfektionsprotokoll ”
Felsökningsguide för DNA-transfektion ”