Agar de sânge, hemoliză și reacții hemolitice
Agar de sânge este un mediu de creștere solid care conține globule roșii. Mediul este utilizat pentru a detecta bacteriile care produc enzime pentru a distruge celulele sanguine. Acest proces este denumit și hemoliză. Gradul în care celulele sanguine sunt hemolizate este utilizat pentru a distinge bacteriile unele de altele.
Mediul de agar din sânge este preparat într-un proces în două etape. În primul rând, un număr de ingrediente sunt adăugate la apă, inclusiv infuzie de inimă, peptonă și clorură de sodiu. Această soluție este sterilizată. După sterilizare, se adaugă o cantitate cunoscută de sânge steril. Sângele poate fi de la iepure sau oaie. Sângele de iepure este preferat dacă bacteria țintă provine din grupul cunoscut sub numele de streptococ din grupul A. Sângele de oaie este preferat dacă bacteria țintă este Haemophilus parahaemolyticus.
Agarul de sânge este o sursă bogată de alimente pentru bacterii. Deci, poate fi utilizat pentru cultivarea primară, adică ca mijloc de a obține o gamă cât mai largă de creștere bacteriană dintr-o probă posibil. De obicei, nu este utilizat în acest scop din cauza cheltuielilor suportului. Alte agare mai puțin costisitoare vor face același lucru. Ceea ce se potrivește în mod unic agarului de sânge este determinarea hemolizei.
Hemoliza este descompunerea membranei celulelor roșii din sânge de către o proteină bacteriană cunoscută sub numele de hemolizină, care determină eliberarea hemoglobinei din sângele roșu. celulă. Multe tipuri de bacterii posedă proteine hemolitice. Se consideră că aceste proteine acționează prin integrarea în membrana celulelor roșii din sânge și prin perforarea unei găuri prin membrană sau perturbarea structurii membranei în alt mod. Detaliile moleculare exacte ale acțiunii hemolizinei sunt încă nerezolvate.
Sângele utilizat în agar este, de asemenea, tratat în prealabil pentru a elimina o moleculă numită fibrină, care participă la coagularea sângelui. Absența fibrinei asigură că coagularea sângelui nu are loc în agar, ceea ce ar putea interfera cu detectarea vizuală a reacțiilor hemolitice.
Există trei tipuri de hemoliză, desemnate alfa, beta și gamma. Hemoliza alfa este o decolorare verzuie care înconjoară o colonie bacteriană care crește pe agar. Acest tip de hemoliză reprezintă o descompunere parțială a hemoglobinei celulelor roșii din sânge. Hemoliza alfa este caracteristică pneumoniei cu Streptococcus și poate fi utilizată ca o caracteristică de diagnostic în identificarea tulpinii bacteriene.
Hemoliza beta reprezintă o descompunere completă a hemoglobinei celulelor roșii din sânge în apropierea unei colonie bacteriană. Există o defrișare a agarului în jurul unei colonii. Hemoliza beta este caracteristică Streptococcus pyogenes și a unor tulpini de Staphylococcus aureus.
Al treilea tip de hemoliză este de fapt nicio hemoliză. Hemoliza gamma este o lipsă de hemoliză în zona din jurul unei colonii bacteriene. O placă de agar din sânge care prezintă hemoliză gammatică pare de fapt maronie. Aceasta este o reacție normală a sângelui la condițiile de creștere utilizate (37 ° C în prezența dioxidului de carbon). Hemoliza gamma este o caracteristică a Enterococcus faecalis.
Reacțiile hemolitice pot prezenta și unele sinergii. Adică, combinația de reacții produce o reacție mai puternică decât oricare dintre reacții. Anumite specii de bacterii, cum ar fi grupul B Strep (n exemplu este Streptococcus agalactiae) sunt slab beta-hemolitice. Cu toate acestea, dacă bacteriile sunt în imediata apropiere cu o tulpină de Stafilococ, betahemolizinele celor două organisme se pot combina pentru a produce o reacție beta hemolitică intensă. Aceasta stă la baza unui test numit test CAMP (după inițialele inventatorilor săi).
Determinarea hemolizei și a reacțiilor hemolitice este utilă pentru a distinge diferitele tipuri de bacterii. Testarea biochimică ulterioară poate restrânge identificarea și mai mult. De exemplu, o reacție beta hemolitică este indicativă a unui streptococ. Testarea organismelor Streptococcus cu bacitracină este adesea pasul următor. Bacitracina este un antimicrobian produs de bacteria Bacillus subtilis. Tulpinile de Streptococcus pyogenes sunt aproape uniform sensibile la bacitracină. Dar alte grupuri antigenice ale streptococului nu sunt sensibile la bacitracină.
Vezi și Tehnici de laborator în microbiologie; Stafilococi și infecții stafilococice; Streptococi și infecții streptococice