Co to jest transformacja DNA
Transformacja plazmidu lub wektora to proces, w którym egzogenny DNA jest przenoszony do komórki gospodarza. Transformacja zwykle oznacza pobieranie DNA do komórek bakteryjnych, drożdżowych lub roślinnych, podczas gdy transfekcja jest terminem zwykle zarezerwowanym dla komórek ssaków. Metodą transformacji konstruktu DNA do komórki gospodarza jest transformacja chemiczna, elektroporacja lub bombardowanie cząsteczkami. W transformacji chemicznej komórki są zdolne do przyjmowania egzogennego DNA przez traktowanie dwuwartościowymi kationami, takimi jak chlorek wapnia, który Ściana komórkowa bardziej przepuszczalna dla DNA. Szok cieplny służy do tymczasowego tworzenia się pory w błonie komórkowej, umożliwiając przeniesienie egzogennego DNA do komórki. Podczas elektroporacji stosuje się krótki impuls elektryczny w celu tymczasowej przepuszczalności komórki bakteryjnej. Bombardowanie cząstkami jest zwykle stosowane do transformacji komórek roślinnych. Cząsteczki złota lub wolframu są powlekane konstruktem DNA i fizycznie wtłaczane do komórki za pomocą pistoletu genowego.
Protokół transfekcji DNA „
Przewodnik rozwiązywania problemów z transfekcją DNA ”