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Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (abgekürzt als PBS) ist eine Pufferlösung, die üblicherweise in der biologischen Forschung verwendet wird. Es ist eine salzige Lösung, die Natriumchlorid, Natriumphosphat und (in einigen Formulierungen) Kaliumchlorid und Kaliumphosphat enthält. Der Puffer hilft, einen konstanten pH aufrechtzuerhalten. Die Osmolarität und die Ionenkonzentrationen der Lösung stimmen normalerweise mit denen des menschlichen Körpers überein (isotonisch).

Anwendungen

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PBS hat viele Verwendungsmöglichkeiten, da es isotonisch und für Zellen nicht toxisch ist. Es kann verwendet werden, um Substanzen zu verdünnen. Es wird verwendet, um Behälter zu spülen, die Zellen enthalten. PBS kann als Verdünnungsmittel bei Methoden zum Trocknen von Biomolekülen verwendet werden, da darin enthaltene Wassermoleküle um die Substanz (z. B. Protein) herum strukturiert werden, die „getrocknet“ und auf einer festen Oberfläche immobilisiert werden soll. Der dünne Wasserfilm, der an die Substanz bindet, verhindert Denaturierung oder andere Konformationsänderungen. Carbonatpuffer können für den gleichen Zweck verwendet werden, jedoch mit geringerer Wirksamkeit. PBS kann verwendet werden, um ein Referenzspektrum aufzunehmen, wenn die Proteinadsorption in der Ellipsometrie gemessen wird.

Additive können verwendet werden, um die Funktion hinzuzufügen. Zum Beispiel wird PBS mit EDTA auch verwendet, um gebundene und verklumpte Zellen zu lösen. Zweiwertige Metalle wie Zink können jedoch nicht zugesetzt werden, da dies zu einer Ausfällung führt. Für diese Art von Anwendungen werden die Puffer von Good empfohlen.

Vorbereitung

Es gibt viele verschiedene Möglichkeiten, PBS vorzubereiten. Einige Formulierungen enthalten kein Kalium, während andere Calcium oder Magnesium enthalten. Eine der gebräuchlichsten Zubereitungen wird nachstehend beschrieben. Ein 10-Liter-Stamm von 10 × PBS kann durch Auflösen von 800 g NaCl hergestellt werden 20 g KCl, 144 g Na 2 HPO 4 · 2H 2 O 24 g KH 2 PO 4 8 l destilliertes Wasser.

Nach dem vollständigen Mischen die endgültige Lösung auf 10 l auffüllen. Der pH-Wert der 10-fachen Stammlösung beträgt ungefähr 6,8, aber wenn sie auf 1 × PBS verdünnt wird, sollte sie sich auf 7,4 ändern. Bei der Herstellung von Pufferlösungen empfiehlt es sich, immer den pH-Wert zu messen direkt mit einem pH-Meter. Falls erforderlich, kann der pH-Wert unter Verwendung von Salzsäure oder Natriumhydroxid eingestellt werden. Bei Verdünnung sollte das resultierende 1 × PBS eine Endkonzentration von 137 mM NaCl, 10 mM Phosphat, 2,7 mM KCl und einen pH von aufweisen 7.4.
Eine andere Zubereitung wird in Molecular Cloning von Sambrook, Fritsch und Maniatis, Anhang B.12 wie folgt beschrieben:

Für 1 Liter 1X PBS wie folgt herstellen:

1. Beginnen Sie mit 800 ml destilliertem Wasser:
2. Fügen Sie 8 g NaCl hinzu.
3. Fügen Sie 0,2 g KCl hinzu.
4. Fügen Sie 1,44 g Na2HPO4 hinzu
5. Fügen Sie 0,24 g KH2PO4 hinzu.
6. Stellen Sie den pH-Wert mit HCl auf 7,4 ein.
7. Fügen Sie destilliertes Wasser bis zu einem Gesamtvolumen von 1 Liter hinzu.

Geben Sie die Lösung in Aliquots ab und sterilisieren Sie sie durch Autoklavieren (20 min, 121 ° C, Flüssigkeitszyklus). Bei Raumtemperatur lagern.

1. Dulbecco, R. et al. (1954): Plaquebildung und Isolierung von reinen Linien mit Poliomyelitis-Viren. In: J. Exp. Med. vol. 99 (2), S. 167-182. PMID 13130792
2. Sambrook, Fritsch und Maniatis (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. Auflage, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, Band 3, Anhang B.12
3. Teile dieses Artikels stammen aus „Phosphatgepufferte Kochsalzlösung. In Wikipedia, der freien Enzyklopädie. Abgerufen am 17. September 2008 von http://en.wikipedia.org/wiki/Phosphate_buffered_saline.“ Dieser Artikel wurde auf wissenschaftliche Richtigkeit überprüft und gemäß der GNU Free Documentation License (GFDL) von Wikipedia verwendet.