Wat is DNA-transformatie
Plasmide- of vectortransformatie is het proces waarbij exogeen DNA wordt overgebracht naar de gastheercel. Transformatie impliceert gewoonlijk opname van DNA in bacteriële, gist- of plantencellen, terwijl transfectie een term is die gewoonlijk gereserveerd is voor zoogdiercellen. methode voor transformatie van een DNA-construct in een gastheercel is chemische transformatie, elektroporatie of deeltjesbombardement. Bij chemische transformatie worden de cellen competent gemaakt (in staat om exogeen DNA op te nemen) door behandeling met tweewaardige kationen zoals calciumchloride, die de bacteriële celwand beter doorlaatbaar voor DNA Warmteschok wordt gebruikt om tijdelijk te vormen poriën in het celmembraan, waardoor het exogene DNA naar de cel kan worden overgebracht. Bij elektroporatie wordt een korte elektrische puls gebruikt om de bacteriële cel tijdelijk permeabel te maken. Deeltjesbombardement wordt typisch gebruikt voor de transformatie van plantencellen. Goud- of wolfraamdeeltjes worden bedekt met het DNA-construct en fysiek in de cel gedwongen door een genpistool.
DNA-transfectieprotocol “
Gids voor het oplossen van problemen met DNA-transfectie “