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내용
- 준비
인산염 완충 식염수 (약칭 PBS)는 생물학 연구에서 일반적으로 사용되는 완충액입니다. 염화나트륨, 인산 나트륨 및 (일부 제제에서) 염화칼륨 및 인산 칼륨을 함유하는 염분 용액입니다. 버퍼는 일정한 pH를 유지하는 데 도움이됩니다. 용액의 삼투압 및 이온 농도는 일반적으로 인체 (등장 성)의 농도와 일치합니다.
응용 프로그램
PBS는 등장 성이고 세포에 무독성이기 때문에 많은 용도로 사용됩니다. 물질을 희석하는 데 사용할 수 있습니다. 세포가 들어있는 용기를 헹구는 데 사용됩니다. PBS는 생체 분자를 건조하는 방법에서 희석제로 사용할 수 있습니다. 그 안에있는 물 분자는 물질 (예 : 단백질) 주위에 구조화되어 건조되고 고체 표면에 고정되기 때문입니다. 물질에 결합하는 얇은 물막은 변성 또는 기타 구조적 변화를 방지합니다. 탄산염 완충액은 동일한 목적으로 사용할 수 있지만 효율성은 떨어집니다. 타원 측정법에서 단백질 흡착을 측정 할 때 PBS를 사용하여 참조 스펙트럼을 얻을 수 있습니다.
기능을 추가하는 데 첨가제를 사용할 수 있습니다. 예를 들어, EDTA가있는 PBS는 또한 부착 및 응집 된 세포를 분리하는 데 사용됩니다. 그러나 아연과 같은 2가 금속은 침전을 초래하므로 첨가 할 수 없습니다. 이러한 유형의 애플리케이션에는 Good의 버퍼를 사용하는 것이 좋습니다.
준비
PBS를 준비하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 일부 제제에는 칼륨이 포함되어 있지 않은 반면 다른 제제에는 칼슘 또는 마그네슘이 포함되어 있습니다. 가장 일반적인 준비 중 하나가 아래에 설명되어 있습니다.
10x PBS의 10 리터 스톡은 NaCl 800g을 용해하여 준비 할 수 있습니다.
- 800g NaCl,
- 20g KCl,
- 144g Na2HPO4 · 2H2O
- 24g KH2PO4
- 8L의 증류수
혼합이 완료된 후 최종 용액을 10L로 채우십시오. 10X 스톡의 pH는 약 6.8이지만 1x PBS로 희석하면 7.4로 변경되어야합니다. 완충 용액을 만들 때는 항상 pH를 측정하는 것이 좋습니다. pH 미터를 직접 사용합니다. 필요한 경우 염산 또는 수산화 나트륨을 사용하여 pH를 조정할 수 있습니다.
희석시 결과 1x PBS의 최종 농도는 137mM NaCl, 10mM 인산염, 2.7mM KCl, pH는 7.4.
다른 준비는 Sambrook, Fritsch and Maniatis의 Molecular Cloning, Apendix B.12에 다음과 같이 설명되어 있습니다.
1 리터의 1X PBS에 대해 다음과 같이 준비합니다.
- 증류수 800ml로 시작 :
- NaCl 8g을 추가합니다.
- KCl 0.2g을 추가합니다.
- Na2HPO4 1.44g을 추가합니다. .
- KH2PO4 0.24g을 추가합니다.
- HCl을 사용하여 pH를 7.4로 조정합니다.
- 총 부피가 1 리터가 될 때까지 증류수를 추가합니다.
용액을 분취 액에 분배하고 오토 클레이브 (20 분, 121 ° C, 액체 순환)로 멸균합니다. 실온에서 보관하십시오.
- Dulbecco, R. et al. (1954) : 소아마비 바이러스가있는 순수한 계통의 플라크 형성 및 분리. 에서 : J. Exp. Med. vol. 99 (2), 167-182 쪽. PMID 13130792
- Sambrook, Fritsch 및 Maniatis (1989) Molecular Cloning : A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, volume 3, apendix B.12
- 이 기사의 일부는 “Phosphate buffered saline. In Wikipedia, the free encyclopedia. 2008 년 9 월 17 일 http://en.wikipedia.org/wiki/Phosphate_buffered_saline에서 검색 함.” 이 기사는 과학적 정확성을 위해 검토되었으며 Wikipedia의 GNU Free Documentation License (GFDL)에 따라 사용되었습니다.