蛍光insituハイブリダイゼーション（FISH）
蛍光insituハイブリダイゼーション（FISH）
FISHとは何ですか？
FISHはどのように機能しますか？
FISHは何に使用されますか？
FISHのプローブの種類はいくつですか？
当社のサービスと製品？
引用/参考文献？
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FISHとは何ですか？
蛍光insituハイブリダイゼーション（FISH）は、染色体の一部に結合する蛍光プローブを使用して高度な配列相補性を示す一種の細胞遺伝学的手法です。蛍光顕微鏡を使用して、蛍光プローブが染色体に結合した場所を見つけることができます。この技術は、特定の遺伝子または遺伝子の一部を含む、個々の細胞内の遺伝物質を視覚化およびマッピングするための新しい方法を研究者に提供します。これは、さまざまな染色体異常やその他の遺伝子変異を理解するための重要なツールです。染色体研究に使用される他のほとんどの手法とは異なり、FISHは活発に分裂している細胞に対して実行する必要がないため、非常に用途の広い手順になります。
図1核内の遺伝子を局在化するためのFISH実験の原理のスキーム。
FISHはどのように機能しますか？
FISHは、たとえば、研究者が特定の遺伝子が個人の染色体内のどこにあるかを特定するのに役立ちます。その仕組みは次のとおりです。
o既知の配列に相補的なプローブを作成します。 。プローブを作成するときは、蛍光マーカーでラベルを付けてください。フルオレセイン、マーカーが付いたヌクレオチドを組み込むことにより。
o染色体を顕微鏡スライドに置き、変性させます。
oプローブを変性させ、顕微鏡スライドに追加し、プローブがその相補体にハイブリダイズできるようにします。
o余分なプローブを洗い流し、蛍光顕微鏡で染色体を観察します。プローブは、ハイブリダイズできるサイトの数に応じて、顕微鏡で1つ以上の蛍光シグナルとして表示されます。
図25つの基本的な手順魚の。 （Oliveira and French 2005）
FISHは何に使用されますか？
FISHは、数値的および構造的異常の識別、マーカー染色体の特性評価、治療効果の監視、最小限の残存病変の検出、骨髄移植後の細胞の起源の追跡など、いくつかの診断アプリケーションに広く使用されています。欠失または増幅の領域の同定、非分裂または最終分化細胞における染色体異常の検出、クローン細胞の系統関与の決定など。さらに、非ランダム染色体再配列の同定、転座分子ブレークポイントの同定、一般的に削除された領域の同定、遺伝子マッピング、体細胞ハイブリッドの特性評価、増幅遺伝子の同定、再配列のメカニズムの研究など、研究に多くの用途があります。 FISHは、2つの生物種のゲノムを比較して、進化の関係を推測するためにも使用されます。
FISHのプローブの種類はいくつですか？
一般に、研究者は3種類のFISHプローブを使用し、それぞれに異なる用途があります。
遺伝子座特異的プローブは染色体の特定の領域に結合します。このタイプのプローブは、研究者が遺伝子のごく一部を分離し、その遺伝子がどの染色体上にあるかを調べたい場合に役立ちます。
アルフォイドまたはセントロメア反復プローブは、各染色体の中央にある反復配列から生成されます。研究者はこれらのプローブを使用して、個人が正しい数の染色体を持っているかどうかを判断します。これらのプローブは、「遺伝子座特異的プローブ」と組み合わせて使用して、特定の染色体から遺伝物質が欠落しているかどうかを判断することもできます。
染色体プローブ全体は、実際には小さなプローブのコレクションであり、それぞれが異なる配列に結合します。与えられた染色体の長さ。科学者は、異なる蛍光色素の混合物で標識された複数のプローブを使用して、各染色体を独自の色で標識することができます。結果として得られる染色体のフルカラーマップは、スペクトル核型として知られています。全染色体プローブは、染色体異常の検査に特に役立ちます。たとえば、ある染色体の一部が別の染色体の末端に付着している場合などです。
当社のサービスと製品：
Creative Biolabsプローブの設計、染色体/細胞の調製から専門家の結果の解釈まで、カスタム蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）サービスの完全な配列を提供します。
| A. | 染色体/細胞の準備：細胞染色体FISH（間期、中期、培養細胞でのFISH）、組織染色体FISH（ホルマリン固定、パラフィンでのFISH-）の実行を支援します。埋め込まれた組織または細胞スライド）およびRNA-FISH（細胞内RNA局在化、RNA処理、定量化を研究するためのFISH）。細胞遺伝学的スライド調製の効率を改善し、FISHシグナルを増加させることを目的とした多数のテストを実施しました。一般的なプロトコルのいくつかの変更により、より明るいFISHシグナルが得られる一方で、より良い染色体拡散、より良い染色体形態、およびより短いハイブリダイゼーション時間がもたらされました。 |
| B 。 | プローブの設計、ラベリング、精製、テスト：FISHプローブは、蛍光インジケーターと結合するDNAの合成断片であるため、結合する染色体または遺伝子を画像解析で直接視覚化できます。システム。当社の確立された標準操作手順により、さまざまな蛍光プローブの標識を効率的に最適化できます。また、お客様の特別なニーズに合わせて実験的なサービスを提供することもできます。カスタマイズされたプローブも利用できます。直接または間接的に標識されたSpectrumOrange、SpectrumGreen、またはSpectrumAquaプローブの選択は、FISHアッセイにおける他のフルオロフォアの使用と組み合わせに依存します。
o全染色体ペインティングプローブ（WPP） |
| C. | In Situハイブリダイゼーション：FISHハイブリダイゼーション条件を最適化し、FISHサービスの完全な配列を提供できます。 |
| D. | 結果の解釈：当社のFISHイメージング分析システムは、蛍光顕微鏡、電荷結合デバイス（ “CCD”）カメラ、およびイメージング分析ソフトウェアで構成されています。3つのコンポーネントはすべて、内部変更を加えたコンポーネントサプライヤーから提供されます。 FISHプローブを使用することにより、画像解析システムにより、医療従事者は染色体内の特定のDNA配列の有無を検出および特定できます。 |
| E. | Pr出生前診断：最適化された出生前診断検出キットは、胎児障害の診断に適用される革新的な技術と標準的な方法を提供します。
oトリソミー（21/18/13/12/9/8） |
| F. | 癌の診断と予後：当社では多くの癌診断検査キットを利用できます。必要に応じて、他のがん診断プローブをカスタマイズすることもできます。
o膀胱がん |
| G. | FISH用試薬：最適化された試薬とソリューションにより、FISH実験をよりスムーズかつ効率的に実行できます。 |
| H。 | 機能：当社のサービスと製品の利点は次のとおりです。
oシンプル、簡単、高速、繰り返し可能 |
引用/参考文献
FISHプローブサンプル：
ヒト1番染色体塗装プローブ（緑） |
ヒト1番染色体アームペインティングプローブ |
ヒト1番染色体末端バンド塗装プローブ |
ヒト1番染色体セントロメアプローブ |
ヒト染色体e1サブテロメアプローブ |
ヒトXIST遺伝子プローブのハイブリダイゼーションシグナル（赤） |
| 表1：カスタムFISHサービス | ||
| サービス | 説明 | 価格 |
| 染色体/細胞の準備 | 細胞の実行をお手伝いします染色体FISH（間期、中期、培養細胞のFISH）および組織染色体FISH（ホルマリン固定、パラフィン包埋組織または細胞スライドのFISH）。 | 注文 |
| プローブの設計、ラベリング、精製、テスト | 定評のある標準的な操作手順により、さまざまな蛍光プローブの標識の効率的な最適化。カスタマイズされたプローブも利用できます。直接標識されたSpectrumOrange、SpectrumGreen、またはSpectrumAquaプローブの選択は、FISHアッセイでの他のフルオロフォアの使用と組み合わせによって異なります。 | 注文 |
| インサイチュハイブリダイゼーション | FISHハイブリダイゼーション条件を最適化し、あらゆる種類のFISHを提供できます研究者向けサービス。 | 注文 |
| 結果の解釈 | 当社のFISHイメージング分析システムは、蛍光顕微鏡、電荷結合デバイス（ “CCD”）カメラ、およびイメージング分析ソフトウェアで構成されています。3つのコンポーネントはすべて、コンポーネントサプライヤーから提供されています。内部修飾。FISHプローブを使用することにより、画像分析システムにより、開業医は染色体内の特定のDNA配列の有無を検出および特定できます。 | 注文 |
リストされているすべてのカスタマイズされたサービス&製品は研究目的でのみ使用され、製薬、診断、治療、またはinvivoでの人間による使用を目的としたものではありません。