Agar sangue, emolisi e reazioni emolitiche
Lagar sangue è un terreno di crescita solido che contiene globuli rossi. Il terreno viene utilizzato per rilevare i batteri che producono enzimi per rompere le cellule del sangue. Questo processo è anche chiamato emolisi. Il grado di emolisi delle cellule del sangue viene utilizzato per distinguere i batteri luno dallaltro.
Il mezzo agar sangue viene preparato in un processo in due fasi. Innanzitutto, vengono aggiunti numerosi ingredienti allacqua, tra cui infuso di cuore, peptone e cloruro di sodio. Questa soluzione è sterilizzata. Dopo la sterilizzazione, viene aggiunta una quantità nota di sangue sterile. Il sangue può essere di coniglio o di pecora. Il sangue di coniglio è preferito se il batterio bersaglio è del gruppo noto come streptococco di gruppo A. Il sangue di pecora è preferito se il batterio bersaglio è Haemophilus parahaemolyticus.
Lagar sangue è una ricca fonte di cibo per i batteri. Quindi, può essere utilizzato per la coltura primaria, cioè come mezzo per ottenere la più ampia gamma di crescita batterica possibile da un campione. In genere non viene utilizzato per questo scopo, tuttavia, a causa della spesa del supporto. Altri agar meno costosi faranno la stessa cosa. Ciò per cui lagar sangue è particolarmente adatto è la determinazione dellemolisi.
Lemolisi è la rottura della membrana dei globuli rossi da parte di una proteina batterica nota come emolisina, che causa il rilascio di emoglobina dal sangue rosso cellula. Molti tipi di batteri possiedono proteine emolitiche. Si pensa che queste proteine agiscano integrandosi nella membrana del globulo rosso e perforando un foro attraverso la membrana o interrompendo la struttura della membrana in qualche altro modo. Gli esatti dettagli molecolari dellazione dellemolisina sono ancora irrisolti.
Anche il sangue utilizzato nellagar viene preventivamente trattato per rimuovere una molecola chiamata fibrina, che partecipa alla coagulazione del sangue. Lassenza di fibrina assicura che la coagulazione del sangue non si verifichi nellagar, che potrebbe interferire con la rilevazione visiva delle reazioni emolitiche.
Esistono tre tipi di emolisi, designati alfa, beta e gamma. Lalfa emolisi è una colorazione verdastra che circonda una colonia batterica che cresce sullagar. Questo tipo di emolisi rappresenta una decomposizione parziale dellemoglobina dei globuli rossi. Lemolisi alfa è caratteristica della polmonite da streptococco e quindi può essere utilizzata come caratteristica diagnostica nellidentificazione del ceppo batterico.
La beta emolisi rappresenta una rottura completa dellemoglobina dei globuli rossi in prossimità di un colonia batterica. Cè una radura dellagar intorno a una colonia. La beta emolisi è caratteristica dello Streptococcus pyogenes e di alcuni ceppi di Staphylococcus aureus.
Il terzo tipo di emolisi in realtà non è affatto emolisi. Lemolisi gamma è una mancanza di emolisi nellarea intorno a una colonia batterica. Una piastra di agar sangue che mostra emolisi gamma appare effettivamente brunastra. Questa è una normale reazione del sangue alle condizioni di crescita utilizzate (37 ° C in presenza di anidride carbonica). Lemolisi gamma è una caratteristica di Enterococcus faecalis.
Anche le reazioni emolitiche possono mostrare una certa sinergia. Cioè, la combinazione di reazioni produce una reazione che è più forte di entrambe le reazioni da sole. Alcune specie di batteri, come lo Streptococco di gruppo B (n esempio è Streptococcus agalactiae) sono debolmente beta-emolitiche. Tuttavia, se i batteri sono in stretta vicinanza con un ceppo di Staphylococcus, le betaemolisine dei due organismi possono combinarsi per produrre unintensa reazione beta emolitica. Questo costituisce la base di un test chiamato CAMP test (dalle iniziali dei suoi inventori).
La determinazione dellemolisi e delle reazioni emolitiche è utile per distinguere diversi tipi di batteri. Successivi test biochimici possono restringere ulteriormente lidentificazione. Ad esempio, una reazione beta emolitica è indicativa di uno streptococco. Il test degli organismi Streptococcus con bacitracina è spesso il passo successivo. La bacitracina è un antimicrobico prodotto dal batterio Bacillus subtilis. I ceppi di Streptococcus pyogenes sono quasi uniformemente sensibili alla bacitracina. Ma altri gruppi antigenici dello streptococco non sono sensibili alla bacitracina.
Vedi anche Tecniche di laboratorio in microbiologia; Stafilococchi e infezioni da stafilococco; Streptococchi e infezioni da streptococco