Mi a DNS-transzformáció
A plazmid vagy a vektor transzformációja az az eljárás, amelynek során az exogén DNS átkerül a gazdasejtbe. A transzformáció általában a DNS baktérium-, élesztő- vagy növényi sejtekbe történő felvételét jelenti, míg a transzfekció az emlőssejtek számára fenntartott kifejezés. A DNS-konstrukció gazdasejtté történő átalakításának módszere kémiai transzformáció, elektroporáció vagy részecske bombázás. A kémiai átalakítás során a sejteket kétértékű kationokkal, például kalcium-kloriddal kezeljük kompetenssé (képesek exogén DNS felvételére), amelyek a baktériumot a sejtfal jobban átjárja a DNS-t pórusok a sejtmembránban, lehetővé téve az exogén DNS átvitelét a sejtbe. Az elektroporáció során rövid elektromos impulzust alkalmaznak a baktériumsejt ideiglenes áteresztővé tételére. A részecske bombázást általában növényi sejtek transzformációjára használják. Az arany- vagy volfrámrészecskéket bevonják a DNS-konstrukcióval, és génfegyverrel fizikailag kényszerítik a sejtbe.
DNS-transzfekciós protokoll “
DNS transzfekció hibaelhárítási útmutató “